全细胞生物催化与还原胺化网络
1. 重组 E. coli 共表达 亮氨酸脱氢酶(LeuDH)甲酸脱氢酶(FDH) 突变体,可在不外加辅因子条件下将 三甲基丙酮酸 还原胺化为 L-叔亮氨酸 / L-新戊甘氨酸
2. LeuDH 偏好 脂肪族 酮酸,而 苯丙氨酸脱氢酶(PheDH) 偏好芳香族酮酸,二者构成互补的非天然氨基酸合成酶库。
3. 双酶共表达时需通过 质粒拷贝数 调控 LeuDH/FDH 比酶活比例,避免辅因子再生成为限速步骤。
4. 引入 转氨酶(TA) 后,全细胞系统可进一步拓展至广谱胺类与氨基酸的 fed-batch 生产。
5. 以氨基酸(而非氨)为胺源时,可使用 章鱼碱脱氢酶(Opine DH) 合成仲胺型 N-羧烷基氨基酸,用于 ACE 抑制剂中间体。
课件编辑
文字字体