一锅法级联合成手性碳水化合物
酸性磷酸酶 PhoN-Sf 与醛缩酶 RAMA 协同:磷酸化 → 醛缩合 → 脱磷酸
一锅法磷酸酶-醛缩酶级联反应三阶段
展示 DHA 在酸性磷酸酶作用下被 PPi 磷酸化为 DHAP,DHAP 与醛在 RAMA 催化下缩合,PPi 耗尽后磷酸酶再水解产物释放磷酸基团并实现循环。
一锅法磷酸酶–醛缩酶级联(pH 4.5)
PhoN-Sf · RAMA · 磷酸基团原位循环
① 磷酸化
DHA
P
P
DHAP
PhoN-Sf
② 醛缩合
P
DHAP
R-CHO
+
醛醇产物-P
RAMA
③ 脱磷酸
P
Pi
手性糖 + Pi
PhoN-Sf
磷酸基团循环
DHA/糖骨架
磷酸基团
醛受体
PPi 耗尽后触发③
阶段 ①
—
PhoN-Sf
在 pH 4.5 利用
PPi
将 DHA 磷酸化为 DHAP(~50 mM,100 min)。
阶段 ②
—
RAMA
催化 DHAP 与醛缩合,构建两个新手性中心(C3/C4)。
阶段 ③
— PPi 耗尽后磷酸酶转为水解活性,
脱磷酸
释放产物并再生 Pi,完成循环。
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