转氨酶活性测定方法对比
α-TA 偶联酶法
原理
偶联
GDH
或
MDH
,通过 NADH 在 340nm 吸光度变化监测反应进程。
适用底物
α-酮酸与 α-氨基酸(如丙酮酸、α-酮戊二酸)。
优点
灵敏度高
,适合精确动力学测定。
缺点
需要偶联酶与 NADH,成本较高;不适用于无紫外吸收的脂肪胺底物。
Amine-TA 光谱/电导法
原理
苯乙酮法
(UV 245nm)、
电导法
或 pH 位移法直接监测底物/产物变化。
适用底物
无紫外吸收的脂肪胺与前手性酮(如环己胺、苯乙酮)。
优点
无需偶联酶
,适合高通量筛选与蛋白质工程。
缺点
灵敏度相对较低,需要校准;电导法受缓冲液离子强度影响。
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