多肽制备的三大路线

对比固相化学合成、重组表达与天然化学连接的适用范围与局限

固相肽合成(SPPS)
· 自动化程度高，适合短肽（<50 aa）
· 面临消旋化与疏水塌陷问题
· 长肽合成产率急剧下降

重组表达
· 适合大蛋白质（>100 aa）
· 受限于翻译后修饰难以精确控制
· 非天然氨基酸引入困难

核心原理
· 硫酯与N端半胱氨酸的化学选择性连接
· S→N 酰基转移自发重排

突破优势
· 突破长度限制，实现全合成蛋白质
· 可引入非天然氨基酸与修饰
· 连接位点形成天然肽键

局限
· 需要N端Cys（可用脱硫拓展）