Nitrilases 的硫醇催化机制
Glu-Lys-Cys 催化三联体介导腈直接水解为羧酸（或酰胺）
① 底物结合
腈基进入活性口袋
→
② 亲核攻击
保守 Cys 攻击腈碳
形成硫代亚氨酸中间体
→
③ 水分子加成
Glu 作广义碱激活 H₂O
Lys 稳定四面体过渡态
→
④ 产物释放
消除 NH₃ → 硫酯 → 羧酸
（或消除硫醇 → 酰胺 副产物）
核心三联体 — Glu-Lys-Cys 是 CN-hydrolase 超家族共同特征；Cys 的巯基直接亲核进攻腈碳，区别于 NHases 的金属水合机制。
酰胺副产物来源 — 当四面体中间体优先消除 酶硫醇 而非水分子时，释放酰胺而非羧酸；强吸电子基团或特定突变体倾向此路径。