从发酵到纯酶：工艺决策树

回顾完整下游工艺的五步决策链

发酵选型
胞内/胞外 · 菌种

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提取路线
破碎 · 抽提

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层析组合
先粗后精

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沉淀结晶
盐析 · 有机溶剂

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稳定化储存
AMFEP · 商业化

① 发酵方式 — 由酶定位（胞内/胞外）与菌种决定，GMO 需追溯来源与副活性谱。

② 破碎与抽提 — 必须匹配酶的定位与稳定性；包涵体需盐酸胍/尿素变性-复性。

③ 层析组合 — 遵循"先粗后精、作用力交替"原则；pI 决定 IEX 选型。

④ 沉淀结晶 — 硫酸铵盐析与有机溶剂沉淀是工业放大的主力。

⑤ 商业化 — AMFEP 规范（砷 3 ppm、铅 10 ppm、重金属 <40 ppm）与稳定剂是最后一关。