1. CHMO_Acineto 的热点突变位点是 F432；将苯丙氨酸替换为疏水性更强的亮氨酸可提高 (−)-内酯 的光学纯度；替换为极性基团（如丝氨酸）则导致 立体偏好翻转。
2. PAMO 具有较窄的底物谱但稳定性高，通过 S441-A442 缺失或 P440N 突变可扩展底物范围。
3. CASTing 全称是 完整活性位点饱和测试，是一种位点受限但随机化的氨基酸替换策略。