反应核心：丙酮酸氧化脱羧 → 乙酰磷酸 + CO₂ + H₂O₂
辅因子：FAD + TPP + Mg²⁺（黄素蛋白，四聚体）
再生目标：通过乙酸激酶 (AK) 将乙酰磷酸的高能磷酸基转移给 ADP → ATP
典型应用：驱动无细胞蛋白合成等高度耗能的体外翻译体系
工程要点：需加过氧化氢酶清除有害 H₂O₂；有氧条件下无需额外再生系统
⚠ E. coli 来源的 PyOx 不偶联高能代谢物生成，不适用于 ATP 再生
反应核心：甲酸 → CO₂↑ + 2e⁻ + 2H⁺（E° = −0.42 V，热力学极有利）
辅因子：无金属、无辅基（仅靠静电效应引导 H⁻ 转移）
再生目标：NAD⁺ → NADH（CO₂ 挥发推动平衡彻底右移）
典型应用：偶联亮氨酸脱氢酶还原胺化制备 L-叔亮氨酸等手性氨基酸
工业代表：Evonik 采用 Candida boidinii FDH，对 NAD⁺ 高度专一
✨ 已进化出可接受 NADP⁺ 及耐热、耐溶剂的工程变体