OYE 活性中心的反式加成机制
FMN 辅基与关键氨基酸残基协同完成烯键的氢负离子转移与质子化
OYE 活性中心反式加成机制
FMN 异咯嗪环 N5 位向底物 β-碳提供氢负离子，Tyr196 侧链向 α-碳提供质子，His191 与 Asn194 通过氢键固定羰基氧，实现净反式加成。
OYE 活性中心 · 反式加成机制
N5
N10-核糖醇
FMN
异咯嗪环
O
α-C
β-C
2-环己烯酮
OH
Tyr196
质子供体
N
His191
Asn194
酰胺侧链
氢键
氢键
H⁻ 转移
H⁺ 质子化
净结果：H₂ 反式加成至 C=C · 立体选择性由 Tyr196 方位决定
FMN N5 → β-C
：
氢负离子
从还原态黄素转移至双键 β 位，形成碳负离子中间体。
Tyr196 → α-C
：酪氨酸侧链羟基同步向 α 位提供
质子
，决定反式加成的立体化学结果。
His191 / Asn194
：通过氢键固定底物羰基氧，
极化并活化
C=C 双键。
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