HbHNL 活性中心与催化机制
α/β-水解酶折叠 · 深埋活性口袋 · 催化三联体与 Lys236 静电稳定
HbHNL 活性中心截面图
展示 α/β-水解酶折叠 HNL 的深埋活性口袋、狭窄底物通道、Ser80-His235-Asp207 催化三联体以及 Lys236 正电荷稳定氰根离子的静电作用。
HbHNL 活性中心截面示意
α/β-水解酶折叠超家族 · 1.1 Å 晶体结构
狭窄通道
活性口袋
Ser
80
His
235
Asp
207
Lys
236
+
CN
−
底物 OH
催化三联体
Ser80-His235-Asp207
Lys236 正电荷
静电稳定 CN⁻
狭窄疏水通道
W128 是通道"门控"
疏水大口袋
容纳芳基/大位阻基团
· 属于 α/β-水解酶折叠
· 无辅因子 · 同源二聚体
· K236L 突变体完全失活
广义酸碱催化
:His235 夺取 Ser80 质子,Ser80 再去质子化底物羟基,触发 C–CN 键断裂。
催化杂泛性
:HbHNL 还能催化硝基醛醇(Henry)反应,是酶 promiscuity 的经典例证。
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