1. 天然醛缩酶的局限性在于对供体底物高度专一，且对非天然受体的立体选择性常不理想。
2. 丙氨酸消旋酶的Tyr265Ala点突变体可将消旋酶改造为醛缩酶，kcat/Km 提升超过 10⁵ 倍。
3. 蛋白质工程的策略包括：定向进化改善酶的底物耐受性和立体选择性；理性设计改造活性口袋结构。
4. 人工催化剂设计涵盖多个层次：从L-脯氨酸等有机小分子催化，到 RNA 核酶，再到计算设计的蛋白质骨架。
5. Class I 醛缩酶通过共价烯胺中间体活化底物；Class II 则依赖金属离子稳定烯醇负离子。