层析技术谱系:按作用力分类
以一张谱系图展示 IEX、HIC、GF、亲和层析的作用力本质与洗脱逻辑
层析技术四象限谱系图
以作用力类型和洗脱方向为两轴,展示IEX、HIC、GF、亲和层析四种核心方法的作用机制与洗脱逻辑。
层析技术谱系:作用力 × 洗脱方向
四大层析方法的核心机制与选型逻辑
→ 作用力类型 →
↑ 洗脱方向 ↑
IEX 离子交换
静电作用 · 升盐洗脱
DEAE
+
−
↑ NaCl 梯度洗脱
HIC 疏水层析
疏水作用 · 降盐洗脱
丁基配基
(NH₄)₂
SO₄
↓ 降盐梯度洗脱
GF 凝胶过滤
尺寸排阻 · 等度洗脱
大
小
→ 等度缓冲液洗脱
亲和层析
生物特异 · 竞争洗脱
Ni
²⁺
His₆
tag
咪唑竞争洗脱
选型核心:根据蛋白 pI、疏水性、分子量、标签特性匹配对应方法
IEX 利用蛋白净电荷差异,pH 偏离 pI 时结合,升盐洗脱;HIC 在高盐下结合疏水表面,降盐洗脱;GF 按分子大小分离,等度洗脱;亲和层析利用特异识别(如 His-tag/Ni²⁺),竞争洗脱。
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