B-FIT 策略的核心依据
基于 B 因子的迭代饱和突变(B-FIT)如何指导酶热稳定性改造
📝 题目 1:
B-FIT(B-factor Iterative Test)策略选择突变位点的主要依据是什么?
A. 选择序列保守性最高的残基进行饱和突变
B. 选择 X 射线晶体结构中 B 因子(温度因子)最高的柔性残基进行 ISM
C. 选择活性中心催化三联体残基进行定向突变
D. 随机选取表面残基进行 epPCR 全随机突变
📝 题目 2:
为什么高 B 因子残基是热稳定性改造的理想靶点?
A. B 因子高意味着该残基参与底物结合
B. B 因子高代表该残基进化上最保守
C. B 因子高反映该位点原子振动幅度大、局部柔性强,是热致去折叠的薄弱点
D. B 因子高说明该残基位于疏水核心
📝 题目 3:
B-FIT 与 CAST/ISM 的主要区别在于:
A. B-FIT 只针对活性中心,CAST 针对全蛋白
B. B-FIT 以结构柔性指标选位点用于稳定性改造;CAST 以活性口袋空间邻近残基用于选择性改造
C. B-FIT 用 DNA shuffling,CAST 用 epPCR
D. B-FIT 不需要晶体结构,CAST 必须依赖晶体结构
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